Серологические и иммунологические исследования

Как подготовится к серологическому анализу крови?

Так как для серологического анализа требуется забор венозной крови, то подготовка к его сдачи носит классические рекомендации для забора крови. Для правильного серологического анализа нужно придерживаться следующих правил:

• За 2-3 дня до процедуры следует воздержаться от приема алкоголя
• В день забора крови избегайте физические и эмоциональные нагрузки
• Анализ следует сдавать до приема лекарственных средств.
• Кровь берут натощак и, как правило, рано утром, поэтому пациенту нужно воздержаться от приема пищи за 8-12 часов до процедуры. Накануне вечером допускается легкий ужин.
• Исключить из рациона жирную и острую пищу
• За 8-10 часов не употреблять сильные газированные напитки, энергетики, кофе и чай.

Записаться на серологическое исследование

Записаться на прием

Что такое серологические исследования, для чего они проводятся, каковы основные методы серологической диагностики?

Серологические исследования — это методы изучения антигенов или антител в биологическом материале больных, основанные на определенных реакциях иммунитета. Обнаружение в биологическом материале антител к возбудителю инфекции или антигенов позволяет установить причину заболевания.

Серологические исследования не обладают 100% специфичностью и чувствительностью при диагностике инфекционных заболеваний. Поэтому оценивать их результаты нужно с учетом клинической картины заболевания. Этим обусловлена необходимость использования для диагностики инфекции нескольких тестов, а также применение методов Western-blot, подтверждающих результаты скрининговых методов.

«Иммуноблоттинг (Вестерн-блот, Western-blot) является фактически конечным верификационным (подтверждающим) методом в цепи иммунологических исследований, которые позволяют сделать окончательное лабораторное заключение. Особенно важный данный тест для подтверждения или опровержения инфекционного заболевания (например, коклющ, боррелиоз и т.д.). Метод Вестрен-блота, как правило, необходим после обнаружения положительных антител класса IgG инфекционного процесса, т.к. именно в такой комбинации происходит более правильная лабораторная интерпретация результатов и дальнейшая тактика лечения пациента. Для постановки Вестерн-блота используют специальные нитроцеллюлозные полоски, на которые методом горизонтального и затем вертикального иммунофореза перенесены белки в порядке нарастания молекулярного веса. Антитела сыворотки пациента взаимодействует с белками в определенных зонах полоски, а дальше происходит ход реакции аналогичный иммуноферметному анализу (ИФА)»,- объясняет к.мед.наук, медицинский директор лаборатории СИНЭВО Украина, Оксана Владиславовна Небыльцова.

Биологический материал, используемый для серологического исследования

• Сыворотка крови
• Слюна
• Фекальные массы

Для диагностики каких состояний используются серологические исследования

Целью серологических исследований является установление эффективности проведенного лечения после выздоровления пациента, а также обнаружение рецидива заболевания. Кроме того, серологические методы могут выявить такие заболевания как:

• Амебиаз
• Лямблиоз
• Описторхоз
• Трихинеллёз
• Токсоплазмоз
• Токсокароз
• Цистицеркоз
• Эхинококкоз
• ЗППП

Основные методы, используемые в серологической диагностике

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ, метод Кунса)

Разновидности метода:

Прямой: микробы или антигены тканей или микробы обрабатваются специальными сыворотками с антителами, а также меченными флюорохромами, которые светятся в УФ-лучах. Бактерии, таким образом, светятся в виде каймы зеленого цвета по периферии клетки. Наблюдается в люминисцентном микроскопе.

Непрямой: мазки обрабатываются антителами антимикробной кроличьей сыворотки. Затем антитела, которые не связались с антигенами микробов, отмываются. Таким образом, выявляются оставшиеся на микробах антитела. В итоге, образуется комплекс микроб + антикроличьи антитела + антимикробные кроличьи антитела, помеченные флюорохромом. Этот комплекс наблюдается в люминесцентном микроскопе.

Для оценки результатов существует четырёхбалльная шкала, которая характеризуется интенсивностью поверхностного жёлто-зелёного свечения клеток антигенов:

+ очень слабое свечение клетки

++ слабое свечение периферии клетки

+++/++++ яркое свечение клетки

Титром реакции считается разведение сыворотки с результатом результат реакции +++ или ++++.

Реакция непрямой гемагглютинации (РНГ)

Реакция пассивной или непрямой гемагглютинации используется при диагностике инфекций, вызванных простейшими, бактериями и риккетсиями.

Методика состоит из нескольких этапов. Сначала эритроциты обрабатываются «отмываются» изотоническим раствором хлорида натрия, после, при необходимости, — раствором танина 1: 20000, далее сенсибилизируются растворимыми антигенами. После обработки буферным изотоническим раствором хлорида натрия, антиген готов к употреблению. Сыворотку разводят в пробирках изотоническим раствором хлорида натрия, после чего к каждой разведенной сыворотке добавляют эритроцитарный диагностикум.

Результаты оценивают по характеру осадка эритроцитов:

+ слабая интенсивность

++ средняя интенсивность

+++ интенсивная реакция

++++ резко интенсивная реакция

Положительным считается результат реакции с интенсивной реакцией +++ или резко интенсивной реакцией ++++, при которых эритроциты покрывают все дно пробирки.

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Метод обладает высокой специфичностью и чувствительностью, более 90%. Основное достоинство — возможность выявления инфекции и прослеживания динамики процесса, на который указывает уровень антител.

Применяется анализ для диагностики широкого круга инфекций, в том числе:

• ВИЧ-инфекция
• Вирусные гепатиты
• ЗППП
• Цитомегаловирусная инфекция
• Герпесная инфекция
• Токсоплазменная инфекция

Результаты новых исследований, опубликованных в International Journal of Obesity, говорят, что пища, употребляемая на завтрак, программирует метаболизм человека на весь последующий день.

Антиген или антитело фиксируется на твёрдых планшетах, затем, с помощью ферментной метки выявляются комплексы антиген – антитело.

ИФА имеет ряд преимуществ перед остальными серологическими методами. Реакция наиболее чувствительная, а в тестах используются универсальные реагенты. Анализ отличается быстротой, возможностью исследования иммуноглобулинов различных классов. В настоящее время ИФА является одним из основных методов лабораторной диагностики.

Оценка результатов ИФА проводится автоматически с помощью специальных приборов. В некоторых случаях также допускается и визуальный учёт результатов реакции. Достоверность серологической диагностики зависит от организации лабораторного контроля, состоящего из нескольких процедур, предназначенных для оценки качества результатов.

likar.info

Виды тестов на коронавирус:

В настоящее время два типа вирусных тестов одобрены: молекулярный тест (ПЦР) и тест на антиген (серологические тесты).

При проведении молекулярных тестов вирус выявляют с помощью полимерной цепной реакции (ПЦР). Молекулярные тесты проводятся путем взятия биологического материала из носогорловой полости.

При проведении тестов на антигены у пациента берется мазок из носогорловой полости или же кровь. Эти биологические материалы используются для обнаружения определенных вирусных белков. Эти тесты менее чувствительны и точны, чем молекулярные, так как нередко показывают ложно-положительные результаты.

Серологический тест

Этот вид анализа используется для выявления антител, которые выработала иммунная система при борьбе с вирусом. Благодаря серологическому тесту можно выяснить, болел ли пациент коронавирусом, и если болел, то сколько времени.

Антитела или иммуноглобулины (Ig)

являются «защитниками» нашего организма от различных вирусов, бактерий и других инфекционных агентов. Иммунная система человека настолько умна, что когда патогены от различных инфекций попадают в организм, она начинает производить определенные белки, цель которых — «уничтожить» и «запомнить» эту инфекцию. Когда патоген встречается снова, антитела вырабатываются быстро и в больших количествах и могут нейтрализовать этот микроорганизм без каких-либо последствий для организма.

Определение различных классов антител в крови является информативным свидетельством текущего или перенесенного инфекционного процесса, помогает оценить стадию развития инфекции. Уровень антител и динамика ответа антител могут отличаться от человека к человеку. Это зависит от состояния иммунной системы человека, наличия сопутствующих заболеваний и других факторов. В частности, при COVID-19 иммуноглобулины начинают формироваться в среднем через 7-14 дней после контакта с вирусом. Важно понимать, что, поскольку антитела не начинают вырабатываться в первый день заражения, тест на иммуноглобулин может быть отрицательным, поскольку тест может падать в течение периода, когда организм еще не прошел время сформировать иммунный ответ.

Иммуноглобулины класса M против SARS-CoV-2 (IgM)

Их уровень обычно доступен для обнаружения не ранее чем через 1-2 недели после контакта с возбудителем (не ранее, чем через 5 дней от появления симптомов при симптоматическом течении), а общий период вероятного обнаружения антител класса М часто составляет менее 2-3 месяцев — в в это время антитела IgM постепенно полностью замещаются IgG. Таким образом, обнаружение антител класса M может указывать на недавнюю инфекцию SARS CoV-2. Однако только результат этого теста не может служить основанием для диагностических выводов. Уровень антител и динамика ответа антител могут варьироваться индивидуально.

Иммуноглобулины класса G для SARS-CoV-2 (IgG)

IgG начинает обнаруживаться в крови примерно через 21-28 дней после заражения, и его уровень может оставаться высоким в течение длительного времени. На основании наличия и уровня антител IgG в крови можно оценить наличие инфекции в прошлом и определить наличие специфического иммунного ответа.

В зависимости от того, иммуноглобулин какого класса выявляется при том или ином виде исследования, эти методы тестирования имеют разную эффективность на разных стадиях заболевания.

Существуют следующие виды серологических тестов:

• Быстрый диагностический
• ИФА-тест
• Хемилюминисцентный анализ
• Нейтрализационный иммуноанализ

Быстрый диагностический метод.

Преимущество этого метода состоит в том, что получить результаты исследования можно в течение 15-20 минут после проведения теста. Он выявляет в крови пациента иммуноглобулины, которые начинает вырабатывать иммунитет сразу же после заражения вирусом. Плюс теста в скорости, минус – в недостаточной точности. Если тест положительный, то с вероятностью в 100 % пациент инфицирован. Но отрицательный тест может быть не действительным и не дает стопроцентной гарантии, что у пациента вируса нет. Этот вид исследования чаще всего рекомендуют проводить перед поездкой в другой регион страны или заграницу.

ИФА-тест

Иммуноферментный анализ позволяет увидеть ответную реакцию иммунной системы на вторжение инфекции. Этот вид исследования известен так же как тест ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay). Тест ELISA занимает больше времени, чем экспресс-тест, но имеет более высокую чувствительность, а это означает, что с большей вероятностью можно будет определить специфические иммуноглобулины в сыворотке крови.

ИФА-исследования проходят:

• все сотрудники медицинских организаций Департамента здравоохранения – еженедельно,
• пациенты стационаров – в день госпитализации,
• пациенты дневных стационаров и КТ-центров – при первом обращении,
• пациенты поликлиник (по направлению врача).

ИХЛА-тест.

Иммунохемилюминесцентный тест – это лабораторное исследование крови. Этот вид исследования является аналогом ИФА. В диагностике коронавируса этот тест хорош тем, что, предположительно, позволяет определить количественный уровень содержания антител IgM или IgG к штамму SARS-CoV-2 коронавируса в клиническом образце (сыворотке, гепаринизированной или цитратной плазме) на автоматизированных анализаторах. Принцип реакции: двухстадийный сэндвич-метод. В реакционную систему входят субстрат, окислитель, фермент-катализатор.

ИХЛА-тест проходят:

• все сотрудники медицинских организаций Департамента здравоохранения – еженедельно,
• пациенты стационаров – в день госпитализации,
• пациенты дневных стационаров и КТ-центров – при первом обращении,
• пациенты поликлиник (по направлению врача).

Нейтрализационный иммуноанализ

Наличие антител в организме еще не значит, что у человека выработался иммунитет к вирусу. Это обусловлено тем, что не все антитела способны нейтрализовать вирус. Большинство серологических тестов дают информацию о качественном или количественном содержании антител к вирусу. Анализ «нейтрализации антител» определяет способность антител предотвратить вирусную репликацию. Этот анализ является «золотым стандартом» для выявления у людей «работающих» антител против коронавируса. Для проведения данного теста используется кровь пациента. Анализ проводится путем смешивания сыворотки с соответствующим вирусом и дальнейшим введением полученной смеси в культуру клеток. Проведение данного вида исследования весьма трудоемкое и занимает как минимум 5 суток. Этот анализ не рекомендуется в качестве обычной диагностической процедуры и используется в основном для научных целей.

Молекулярные исследования

Подтверждение наличия патогенных факторов также возможно благодаря молекулярным тестам с использованием метода ПЦР (полимеразная цепная реакция). Это генетический тест, который позволяет обнаружить ДНК или РНК определенного патогена в образце, взятом у пациента (материалом для теста может быть мазок из уретры, шейки матки, горла или заднего прохода).

Молекулярные исследования методом ПЦР

Этот тест отличается высокой чувствительностью и специфичностью, что позволяет обнаруживать патогены как можно раньше (из всех диагностических методов).

ОНЛАЙН-ЗАПИСЬ в клинику ДИАНА

Вы можете записаться по бесплатному номеру телефона 8-800-707-15-60 или заполнить контактную форму. В этом случае мы свяжемся с вами сами.

Серологические исследования

Серологические тесты выполняются путем лабораторного анализа сыворотки крови пациента, и они позволяют проверить наличие антигенов и антител, специфичных для данного патогена.

Чтобы результат такого теста был надежным, необходимо, чтобы инфицированный организм произвел измеримое количество антител, поэтому обычно необходимо подождать несколько недель с момента потенциального заражения (например, в случае сифилиса необходимо подождать не менее 4 недель). В настоящее время серологические тесты на венерические заболевания можно проводить, не выходя из дома, что является очень удобной альтернативой для пациентов.

Скрининговый набор для серологического теста на венерические заболевания